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紅色毛癬菌LAMP試劑盒反應(yīng)五要素

更新時(shí)間:2022-10-12點(diǎn)擊次數(shù):1076

紅色毛癬菌LAMP試劑盒反應(yīng)五要素:


參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


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引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:


①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。


②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。


③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

     

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。


⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。


⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。


⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。


引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白

重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)

重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)




TEL:021-61210612

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